猪布鲁氏菌病
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猪布鲁氏菌病(Brucella Suis disease)是由布鲁氏菌引起的人、畜共患的一种急性或慢性传染病。本病的特征是妊娠母畜发生流产、胎衣不下、生殖器官及胎膜发炎、睾丸炎、巨噬细胞增生和肉芽肿形成。本病已广泛分布于世界各地，我国某些地方有牛、羊、猪、犬种布鲁氏菌病发生，给畜牧业和人的健康带来较大的危害。猪的布鲁氏菌病是人感染该病的重要传染源之一，猪种布鲁氏菌对人类具有很强的致病性，因此，防制猪布鲁氏菌病具有重要的公共卫生意义。
01. 猪病概述
猪布鲁氏菌病(Brucella Suis disease)是由布鲁氏菌引起的人、畜共患的一种急性或慢性传染病。本病的特征是妊娠母畜发生流产、胎衣不下、生殖器官及胎膜发炎、睾丸炎、巨噬细胞增生和肉芽肿形成。本病已广泛分布于世界各地，我国某些地方有牛、羊、猪、犬种布鲁氏菌病发生，给畜牧业和人的健康带来较大的危害。猪的布鲁氏菌病是人感染该病的重要传染源之一，猪种布鲁氏菌对人类具有很强的致病性，因此，防制猪布鲁氏菌病具有重要的公共卫生意义。
02. 病原
布鲁氏菌属（Brucella）有6个种和20个生物型组成，猪布鲁氏菌生物1型和3型易感宿主是猪，对人有强的致病性。本菌为球状短杆菌，0.5～0.7µm×0.6～1.5µm，用病料涂片、染色、镜检时，常单个排列或密集成堆。成对，不形成荚膜和芽孢，无鞭毛，不能运动。革兰氏染色阴性，姬姆萨染色呈紫色。由于本菌吸收染料过程较慢，较其他细菌难于着色，所以，常用科兹洛夫斯基染色法染色，布鲁氏菌呈红色，其他细菌呈绿色。染色的方法是：病料涂片干燥后，滴加2％沙黄液，加热至蒸汽l～2min，水洗，再滴加1％孔雀绿溶液复染(不加热) l～2min，水洗、干燥后镜检。 本菌为需氧兼性厌氧菌。最适生长温度37℃，最适pH为6.6～7.4。对营养要求严格，初次分离，须在含有血液、血清、肝汤、马铃薯浸液或胰酶消化蛋白胨等培养基上生长。初次分离培养时，生长缓慢，常要1周以上才能充分发育，待驯化后传代，则2～3天就能生长良好。牛、羊种布鲁氏菌从病料初次分离培养时，需在10％C02环境中才能生长，几代后则不需要。 在营养琼脂上，可以长出圆形、表面光滑、湿润、隆起、边缘整齐、闪光的小菌落，透光呈淡黄色，侧光呈轻微乳色和略带蓝灰色，菌落大小不等。在马铃薯斜面上可长出微带棕黄色菌苔。在液体培养基中呈轻度混浊，培养久时，可形成菌环。本菌一般能分解葡萄糖、木糖等糖类，产生少量酸，不分解甘露醇，接触酶试验、氧化酶试验呈阳性，不产生靛基质，不液化明胶，不凝固牛奶，不溶解红细胞，不利用柠檬酸盐，VP试验，吲哚、甲基红试验阴性，有的菌株能分解尿素，产生硫化氢，还原硝酸盐。 布鲁氏菌对外界环境因素的抵抗力较强，如对干燥有较强抵抗力，在干燥土壤中存活2个月；干的胎膜内存活4个月；污染粪水中存活4个月以上；衣服、皮毛上可保存5个月。流产胎儿中活75天，子宫渗出物中存活200天，乳、肉食品中存活2个月；对寒冷抵抗力也强，冷乳中存活40天以上，在冷暗处的胎儿体内可活6个月。但对热很敏感，60℃加热30min，70℃ 5～10min死亡，煮沸立即死亡。对消毒药的抵抗力不强，兽医常用的一般消毒药，如3％石炭酸、来苏儿、臭药水、5％漂白粉、2％甲醛液、5％石灰水、0.5％洗必泰、0.1％新洁尔灭、消毒净等，都能在较短时间内将其杀死。
03. 流行病学
多种动物和禽类对布鲁氏菌均有不同程度的易感性。但自然病例中，仍以家养的牛、羊(绵羊、山羊)、猪最易感。此外，水牛、牦牛、野牛、羚羊、鹿、骆驼、野猪、马、狗、猫、狼、狐狸、猴、野兔、鸡、鸭及一些啮齿动物等以及人都可自然感染。实验动物中，以豚鼠、小鼠、鸽和幼猫易感，家兔次之，但豚鼠最为易感。不同种别的布鲁氏菌各有其主要宿主动物，如牛种布鲁氏菌主要感染牛，还能感染马、犬、鹿、绵羊、骆驼、猫及人；羊种布鲁氏菌主要感染山羊、绵羊，还能感染牛、猪、鹿、骆驼和人；猪种布鲁氏杆菌除感染猪外，也可感染牛、马、鹿、羊和人；绵羊附睾布鲁氏菌、犬种布鲁氏菌、沙林鼠布鲁氏菌只能感染本类动物。 我国人感染的布鲁氏菌病主要是羊型，其次为猪型，牛型最少。 病猪或带菌猪是主要传染来源。病菌主要存在于被感染母猪的胎儿、胎衣、乳房及淋巴结中。当病母猪流产时是最危险的时期，可从胎儿、胎衣、胎水、奶、尿、阴道分泌物中大量排出细菌，污染产房、猪圈及其他物品。流产母猪的乳汁也在一定时间内排菌。病公猪的精液中也可有病原体，随精液传播疾病，这对公猪传播本病来说更为重要。 本病的传染途径主要是消化道，即通过采食被污染的饲料和饮水感染。其次是皮肤、黏膜及生殖道。本菌有强的侵袭力和扩散力，不仅可从破损的皮肤侵入机体，而且可从无创伤的皮肤、黏膜侵入机体。交配传染，是猪的重要传染途径之一。若病公猪精液中有病原体时，人工授精时，可使母猪被感染。 野猪也可感染猪种布鲁氏菌，野猪与家猪接触，就可能传播该病。母猪较公猪易感；幼龄猪只对本病有一定抵抗力，随着年龄增长易感性增高，性成熟后对本病很易感。所以，5月龄以下的猪对本病有一定的抵抗力。
04. 临床症状
母猪主要症状是流产，大多发生在怀孕的第30～50天或80～110天，在妊娠的2～3周早期流产时，胎儿和胎衣多被母猪吃掉，常不被发现。流产前可见母猪精神沉郁，阴唇和乳房肿胀，有时可见从阴道流出分泌物，也有流产前见不到明显的症状。流产的胎儿大多为死胎，并可能发生胎衣不下及子宫炎，影响配种。有的病猪产出弱胎或木乃伊胎。流产后从阴道排出黏性红色分泌物，大多经8～10天可消失。流产后又可怀孕，重复流产的较少见。新受感染的猪场，流产数量较多。 公猪主要症状是睾丸炎和附睾炎，一侧或两侧无痛性肿大，有的极为明显。有的病状较急，局部有热痛，并伴有全身症状。有的病猪睾丸发生萎缩、硬化，性欲减退，丧失配种能力。据某猪场报道，在14头公猪中，9头发生睾丸炎，可见其危害性。 无论公、母猪都可能发生关节炎，大多发生在后肢，偶见于脊柱关节，可使病猪后肢麻痹。局部关节肿大、疼痛，关节囊内液体增多，出现关节强硬，跛行。据某地统计介绍，有41％的病猪呈现跛行。
05. 诊断鉴别
引起母猪发生流产的原因较多，特别是近些年一部分新的病毒性传染病的发生和流行，使诊断工作更为复杂。也就是说，病原性和非病原性的原因都可引起猪发生流产。就布鲁氏菌病来说，流行病学、症状及剖检变化还是可以作为诊断的依据。但要确诊，必须有赖于实验室细菌学、血清学的检验，特别是本病多呈隐性感染，只有反复多次检验，方可达到早期诊断的目的。 1．猪布鲁氏茵病的特征 临诊上母猪的流产、公猪睾丸和附睾的炎症、流产胎儿状态，以及胎儿、胎衣及子宫、公猪睾丸的病理变化等都可作为初步诊断的依据。 2．细菌学检查 (1)病料抹片、染色、镜检 流产胎儿、胎衣、分泌物中常有大量细菌，采集胎衣分泌物、流产胎儿的胃内容物、脾、肝、淋巴结、子宫坏死部分等组织做抹片，用革兰氏染色法染色见到革兰氏阴性菌，用柯兹洛夫斯基染色法染色，常可见到被染成淡红色的小球杆状菌，其他细菌或组织呈绿色。 (2)分离培养 采取病料接种于10％马血清的马丁琼脂斜面。如病料有杂菌污染时，可用选择培养基培养。即是在lOOmL马丁琼脂或肝汤琼脂中，加人2500IU杆菌肽、lOmg放线菌酮、600IU多黏菌素B，混合后倒人平皿中，供分离培养用。接种病料后，37℃培养，每3天观察一次。如有细菌生长，挑选可疑的菌落做细菌鉴定，如抹片、染色、镜检。将疑似菌落进行纯培养，进一步做布鲁氏菌生物学特性检验，用抗血清做玻片凝集试验等。 3．动物接种 无菌取胎儿脾、肝、胃内容物，加生理盐水磨碎，取两只体重350～400g的豚鼠，腹腔或皮下注射1～2mL。接种前采血做布鲁氏菌凝集反应检查，接种后从第2周开始，每隔7～10天采血一次，做布鲁氏菌凝集反应，观察凝集反应滴度是否升高，若接种后凝集反应血清滴度达到1：5～1：10或更高时，即为阳性。同时扑杀豚鼠，可见淋巴结肿大，肝、脾肿大，并有灰白色细小的坏死结节。取脾、肝和淋巴结做细菌分离培养，若分离培养有可疑菌落，则用已知布鲁氏菌阳性血清做凝集反应，凝集反应为阳性，则可确定为布鲁氏菌。若血清滴度达到1：5～1：10或更高，即使分离不出布鲁氏菌，也可诊断为布鲁氏菌病。若接种动物临诊上不发病，剖检也无病变，细菌分离培养阴性，凝集反应阴性时可判为阴性。 4．血清学凝集反应 血清学诊断最具有实际意义。一般是细菌侵入机体后，经7～15天血液中就出现凝集抗体，随后凝集滴度逐渐增高。病畜流产后10天以上，大多数血凝滴度升高，阳性反应可保持几个月甚至2～3年以上。因此，流产后采血时间要在7～10天以后为好。目前，广泛采用凝集反应，常用的有血清玻板凝集反应和血清试管凝集反应。具体操作方法及判定按农业部颁发的操作规程进行。 5．其他方法 补体结合反应：病畜感染后7～14天，血液中出现补体结合抗体，保持时间比凝集素要长，特异性和敏感性也高，对布鲁氏菌病诊断有特殊的诊断价值。但由于此法操作复杂，一般实验室不做此项检查。近年来，还用间接红细胞凝集试验、间接碳凝集试验、抗球蛋白试验、酶联免疫吸附试验、荧光抗体法、DNA探针、PCR等检验本病。 6．鉴别诊断 猪布鲁氏菌病要与猪细小病毒感染、猪繁殖和呼吸障碍综合征、猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪衣原体病、猪瘟、猪钩端螺旋体病、猪弓形虫病等引起的流产相区别。
06. 病理变化
流产胎儿的状态不同，有的为木乃伊干尸化，有的为弱仔或健活，死亡胎儿可见浆膜上有絮状纤维素分泌物，胸、腹腔有少量微红色液体及混有纤维素。胃内容物有黄色或白色混浊的黏液，并混有小的絮状物。有的黏膜上见有小出血点。流产的猪胎衣充血、出血和水肿，表面覆盖淡黄色渗出物，有的还见有坏死。 母猪子宫黏膜充血、出血和有炎性分泌物，约40％患病母猪的子宫黏膜上有许多如大头针帽至粟粒大的淡黄色小结节，质硬，切开可见少量化脓或干酪样物质；有的可见小结节互相融合成不规则的斑块，使子宫壁变厚和内腔狭窄，常称为粟粒性子宫布鲁氏菌病。 公猪的睾丸及副睾常见炎性坏死灶，鞘膜腔充满浆性渗出液；慢性者睾丸及副睾结缔组织增生、肥厚及粘连。精囊可能有出血及坏死灶。公猪睾丸及副睾肿大，切开见有豌豆大小的化脓和坏死灶、化脓灶，甚至有钙化灶。据统计，34％～95％病猪的睾丸发生化胀坏死性炎症。 猪患布鲁氏菌病还常见有关节炎，主要侵害四肢较大的复活关节。滑液囊有浆液和纤维素，重时见有化脓性炎症和坏死，甚至还见脊柱骨、管骨的炎症或脓肿。淋巴结、肝、脾、肾、乳腺等也可能见到布鲁氏菌病性结节病变。
07. 防治措施
1．坚决保护健康猪群 对从未发生过布鲁氏菌病的健康猪群，必须贯彻“预防为主”的方针和坚持自繁自养的原则，防止从外部引入病猪。若必须从外单位引进种猪时，应从无此病地区购买，要进行检疫，购进后隔离观察2个月，再进行检疫，确实健康的方可并群饲养。同时，也要防止运入被污染的畜产品和饲料。每年定期对猪群进行布鲁氏菌病检疫，以能及时发现病猪。若有原因不明的流产时，必须严格隔离流产母猪，对流产胎儿及胎衣要进行微生物学检查，而且要严格消毒处理，对流产猪只做血清学检查，直到证明为非传染性流产时，才能取消隔离。 2．受威胁猪群的预防措施 (1)对猪群进行定期检疫(至少每年一次)，并要当作一件防疫制度固定执行，以能及时发现和处理患病猪只。 (2)定期进行免疫注射，是预防控制本病的有效措施。 我国用于预防猪布鲁氏菌病的是用猪布鲁氏菌弱毒S2株制成的活疫苗。该苗毒力稳定、使用安全、免疫力好，是我国选育的一种优良布鲁氏菌菌苗。本疫苗适于口服免疫和肌肉注射。 ①口服免疫：每头猪200亿菌，间隔1个月再口服一次。口服菌苗不受怀孕限制，可在配种前1～2个月进行，亦可在怀孕期使用。如果猪群大，可按全群猪数计算所需菌苗量，将菌苗拌入水中或饲料中，让全群饮服。如果猪数少，可逐头灌服。在饮服时，不能用热水以免烫死细菌，拌入饲料中时，应避免使用含有抗生素添加剂的饲料、发酵饲料或热饲料。在服菌苗前后3天，应停止使用抗生素添加剂饲料和发酵饲料。 ②注射免疫：每头猪200亿菌，间隔1个月再注射一次。妊娠母猪不宜注射。所用菌应稀释后当天用完。无论猪是口服还是注射，免疫期为1年。本疫苗对人有一定致病力，工作人员在使用疫苗时，应注意个人防护，以防感染。用具需煮沸消毒。 3．发病种猪群的康复措施 (1)定期检疫和隔离病猪 用凝集反应定期普遍检疫，将检出的阳性和可疑反应病种行屠宰淘汰。特别贵重的种猪可隔离饲养，继续利用。曾检出病猪的猪群在未达到净化前，应当做可疑病猪群隔离饲养，并反复地进行检疫，及时挑出病猪。对隔离群要严行隔离措施，避免病、健康猪只接触，防止人员互相串往。在经两次连续检疫，全群无流产和公猪睾丸炎病例时，才可认为本猪群得到净化。 (2)加强消毒及兽医卫生措施 对隔离猪场、用具等进行常规的消毒。做好猪产房的卫生及消毒工作。妥善处理流产胎儿、胎衣、胎水及分泌物。粪便堆积发酵后利用。工作人员的防护工作。特别是发生流产时要注意防护。 (3)病种猪的处理 由于猪只饲养的周转较快，病猪以饲养屠宰淘汰为宜。实践证明逐步淘汰和肉品合理利用是一种积极的措施，各地可因地制宜采用。此外，对特别贵重的病种猪，可考虑进行对症治疗，如子宫炎时的冲洗和治疗、抗生素的应用等等。 (4)培育健康幼龄种猪 这是净化病猪群，更新猪群的一项积极措施。仔猪在断乳后饲养，2月龄和4月龄各检疫一次，两次检疫为阴性时，才可认为是健康仔猪。
猪布鲁氏菌病(Brucella Suis disease)是由布鲁氏菌引起的人、畜共患的一种急性或慢性传染病。本病的特征是妊娠母畜发生流产、胎衣不下、生殖器官及胎膜发炎、睾丸炎、巨噬细胞增生和肉芽肿形成。本病已广泛分布于世界各地，我国某些地方有牛、羊、猪、犬种布鲁氏菌病发生，给畜牧业和人的健康带来较大的危害。猪的布鲁氏菌病是人感染该病的重要传染源之一，猪种布鲁氏菌对人类具有很强的致病性，因此，防制猪布鲁氏菌病具有重要的公共卫生意义。
01. 猪病概述
猪布鲁氏菌病(Brucella Suis disease)是由布鲁氏菌引起的人、畜共患的一种急性或慢性传染病。本病的特征是妊娠母畜发生流产、胎衣不下、生殖器官及胎膜发炎、睾丸炎、巨噬细胞增生和肉芽肿形成。本病已广泛分布于世界各地，我国某些地方有牛、羊、猪、犬种布鲁氏菌病发生，给畜牧业和人的健康带来较大的危害。猪的布鲁氏菌病是人感染该病的重要传染源之一，猪种布鲁氏菌对人类具有很强的致病性，因此，防制猪布鲁氏菌病具有重要的公共卫生意义。
02. 病原
布鲁氏菌属（Brucella）有6个种和20个生物型组成，猪布鲁氏菌生物1型和3型易感宿主是猪，对人有强的致病性。本菌为球状短杆菌，0.5～0.7µm×0.6～1.5µm，用病料涂片、染色、镜检时，常单个排列或密集成堆。成对，不形成荚膜和芽孢，无鞭毛，不能运动。革兰氏染色阴性，姬姆萨染色呈紫色。由于本菌吸收染料过程较慢，较其他细菌难于着色，所以，常用科兹洛夫斯基染色法染色，布鲁氏菌呈红色，其他细菌呈绿色。染色的方法是：病料涂片干燥后，滴加2％沙黄液，加热至蒸汽l～2min，水洗，再滴加1％孔雀绿溶液复染(不加热) l～2min，水洗、干燥后镜检。 本菌为需氧兼性厌氧菌。最适生长温度37℃，最适pH为6.6～7.4。对营养要求严格，初次分离，须在含有血液、血清、肝汤、马铃薯浸液或胰酶消化蛋白胨等培养基上生长。初次分离培养时，生长缓慢，常要1周以上才能充分发育，待驯化后传代，则2～3天就能生长良好。牛、羊种布鲁氏菌从病料初次分离培养时，需在10％C02环境中才能生长，几代后则不需要。 在营养琼脂上，可以长出圆形、表面光滑、湿润、隆起、边缘整齐、闪光的小菌落，透光呈淡黄色，侧光呈轻微乳色和略带蓝灰色，菌落大小不等。在马铃薯斜面上可长出微带棕黄色菌苔。在液体培养基中呈轻度混浊，培养久时，可形成菌环。本菌一般能分解葡萄糖、木糖等糖类，产生少量酸，不分解甘露醇，接触酶试验、氧化酶试验呈阳性，不产生靛基质，不液化明胶，不凝固牛奶，不溶解红细胞，不利用柠檬酸盐，VP试验，吲哚、甲基红试验阴性，有的菌株能分解尿素，产生硫化氢，还原硝酸盐。 布鲁氏菌对外界环境因素的抵抗力较强，如对干燥有较强抵抗力，在干燥土壤中存活2个月；干的胎膜内存活4个月；污染粪水中存活4个月以上；衣服、皮毛上可保存5个月。流产胎儿中活75天，子宫渗出物中存活200天，乳、肉食品中存活2个月；对寒冷抵抗力也强，冷乳中存活40天以上，在冷暗处的胎儿体内可活6个月。但对热很敏感，60℃加热30min，70℃ 5～10min死亡，煮沸立即死亡。对消毒药的抵抗力不强，兽医常用的一般消毒药，如3％石炭酸、来苏儿、臭药水、5％漂白粉、2％甲醛液、5％石灰水、0.5％洗必泰、0.1％新洁尔灭、消毒净等，都能在较短时间内将其杀死。
03. 流行病学
多种动物和禽类对布鲁氏菌均有不同程度的易感性。但自然病例中，仍以家养的牛、羊(绵羊、山羊)、猪最易感。此外，水牛、牦牛、野牛、羚羊、鹿、骆驼、野猪、马、狗、猫、狼、狐狸、猴、野兔、鸡、鸭及一些啮齿动物等以及人都可自然感染。实验动物中，以豚鼠、小鼠、鸽和幼猫易感，家兔次之，但豚鼠最为易感。不同种别的布鲁氏菌各有其主要宿主动物，如牛种布鲁氏菌主要感染牛，还能感染马、犬、鹿、绵羊、骆驼、猫及人；羊种布鲁氏菌主要感染山羊、绵羊，还能感染牛、猪、鹿、骆驼和人；猪种布鲁氏杆菌除感染猪外，也可感染牛、马、鹿、羊和人；绵羊附睾布鲁氏菌、犬种布鲁氏菌、沙林鼠布鲁氏菌只能感染本类动物。 我国人感染的布鲁氏菌病主要是羊型，其次为猪型，牛型最少。 病猪或带菌猪是主要传染来源。病菌主要存在于被感染母猪的胎儿、胎衣、乳房及淋巴结中。当病母猪流产时是最危险的时期，可从胎儿、胎衣、胎水、奶、尿、阴道分泌物中大量排出细菌，污染产房、猪圈及其他物品。流产母猪的乳汁也在一定时间内排菌。病公猪的精液中也可有病原体，随精液传播疾病，这对公猪传播本病来说更为重要。 本病的传染途径主要是消化道，即通过采食被污染的饲料和饮水感染。其次是皮肤、黏膜及生殖道。本菌有强的侵袭力和扩散力，不仅可从破损的皮肤侵入机体，而且可从无创伤的皮肤、黏膜侵入机体。交配传染，是猪的重要传染途径之一。若病公猪精液中有病原体时，人工授精时，可使母猪被感染。 野猪也可感染猪种布鲁氏菌，野猪与家猪接触，就可能传播该病。母猪较公猪易感；幼龄猪只对本病有一定抵抗力，随着年龄增长易感性增高，性成熟后对本病很易感。所以，5月龄以下的猪对本病有一定的抵抗力。
04. 临床症状
母猪主要症状是流产，大多发生在怀孕的第30～50天或80～110天，在妊娠的2～3周早期流产时，胎儿和胎衣多被母猪吃掉，常不被发现。流产前可见母猪精神沉郁，阴唇和乳房肿胀，有时可见从阴道流出分泌物，也有流产前见不到明显的症状。流产的胎儿大多为死胎，并可能发生胎衣不下及子宫炎，影响配种。有的病猪产出弱胎或木乃伊胎。流产后从阴道排出黏性红色分泌物，大多经8～10天可消失。流产后又可怀孕，重复流产的较少见。新受感染的猪场，流产数量较多。 公猪主要症状是睾丸炎和附睾炎，一侧或两侧无痛性肿大，有的极为明显。有的病状较急，局部有热痛，并伴有全身症状。有的病猪睾丸发生萎缩、硬化，性欲减退，丧失配种能力。据某猪场报道，在14头公猪中，9头发生睾丸炎，可见其危害性。 无论公、母猪都可能发生关节炎，大多发生在后肢，偶见于脊柱关节，可使病猪后肢麻痹。局部关节肿大、疼痛，关节囊内液体增多，出现关节强硬，跛行。据某地统计介绍，有41％的病猪呈现跛行。
05. 诊断鉴别
引起母猪发生流产的原因较多，特别是近些年一部分新的病毒性传染病的发生和流行，使诊断工作更为复杂。也就是说，病原性和非病原性的原因都可引起猪发生流产。就布鲁氏菌病来说，流行病学、症状及剖检变化还是可以作为诊断的依据。但要确诊，必须有赖于实验室细菌学、血清学的检验，特别是本病多呈隐性感染，只有反复多次检验，方可达到早期诊断的目的。 1．猪布鲁氏茵病的特征 临诊上母猪的流产、公猪睾丸和附睾的炎症、流产胎儿状态，以及胎儿、胎衣及子宫、公猪睾丸的病理变化等都可作为初步诊断的依据。 2．细菌学检查 (1)病料抹片、染色、镜检 流产胎儿、胎衣、分泌物中常有大量细菌，采集胎衣分泌物、流产胎儿的胃内容物、脾、肝、淋巴结、子宫坏死部分等组织做抹片，用革兰氏染色法染色见到革兰氏阴性菌，用柯兹洛夫斯基染色法染色，常可见到被染成淡红色的小球杆状菌，其他细菌或组织呈绿色。 (2)分离培养 采取病料接种于10％马血清的马丁琼脂斜面。如病料有杂菌污染时，可用选择培养基培养。即是在lOOmL马丁琼脂或肝汤琼脂中，加人2500IU杆菌肽、lOmg放线菌酮、600IU多黏菌素B，混合后倒人平皿中，供分离培养用。接种病料后，37℃培养，每3天观察一次。如有细菌生长，挑选可疑的菌落做细菌鉴定，如抹片、染色、镜检。将疑似菌落进行纯培养，进一步做布鲁氏菌生物学特性检验，用抗血清做玻片凝集试验等。 3．动物接种 无菌取胎儿脾、肝、胃内容物，加生理盐水磨碎，取两只体重350～400g的豚鼠，腹腔或皮下注射1～2mL。接种前采血做布鲁氏菌凝集反应检查，接种后从第2周开始，每隔7～10天采血一次，做布鲁氏菌凝集反应，观察凝集反应滴度是否升高，若接种后凝集反应血清滴度达到1：5～1：10或更高时，即为阳性。同时扑杀豚鼠，可见淋巴结肿大，肝、脾肿大，并有灰白色细小的坏死结节。取脾、肝和淋巴结做细菌分离培养，若分离培养有可疑菌落，则用已知布鲁氏菌阳性血清做凝集反应，凝集反应为阳性，则可确定为布鲁氏菌。若血清滴度达到1：5～1：10或更高，即使分离不出布鲁氏菌，也可诊断为布鲁氏菌病。若接种动物临诊上不发病，剖检也无病变，细菌分离培养阴性，凝集反应阴性时可判为阴性。 4．血清学凝集反应 血清学诊断最具有实际意义。一般是细菌侵入机体后，经7～15天血液中就出现凝集抗体，随后凝集滴度逐渐增高。病畜流产后10天以上，大多数血凝滴度升高，阳性反应可保持几个月甚至2～3年以上。因此，流产后采血时间要在7～10天以后为好。目前，广泛采用凝集反应，常用的有血清玻板凝集反应和血清试管凝集反应。具体操作方法及判定按农业部颁发的操作规程进行。 5．其他方法 补体结合反应：病畜感染后7～14天，血液中出现补体结合抗体，保持时间比凝集素要长，特异性和敏感性也高，对布鲁氏菌病诊断有特殊的诊断价值。但由于此法操作复杂，一般实验室不做此项检查。近年来，还用间接红细胞凝集试验、间接碳凝集试验、抗球蛋白试验、酶联免疫吸附试验、荧光抗体法、DNA探针、PCR等检验本病。 6．鉴别诊断 猪布鲁氏菌病要与猪细小病毒感染、猪繁殖和呼吸障碍综合征、猪伪狂犬病、猪乙型脑炎、猪衣原体病、猪瘟、猪钩端螺旋体病、猪弓形虫病等引起的流产相区别。
06. 病理变化
流产胎儿的状态不同，有的为木乃伊干尸化，有的为弱仔或健活，死亡胎儿可见浆膜上有絮状纤维素分泌物，胸、腹腔有少量微红色液体及混有纤维素。胃内容物有黄色或白色混浊的黏液，并混有小的絮状物。有的黏膜上见有小出血点。流产的猪胎衣充血、出血和水肿，表面覆盖淡黄色渗出物，有的还见有坏死。 母猪子宫黏膜充血、出血和有炎性分泌物，约40％患病母猪的子宫黏膜上有许多如大头针帽至粟粒大的淡黄色小结节，质硬，切开可见少量化脓或干酪样物质；有的可见小结节互相融合成不规则的斑块，使子宫壁变厚和内腔狭窄，常称为粟粒性子宫布鲁氏菌病。 公猪的睾丸及副睾常见炎性坏死灶，鞘膜腔充满浆性渗出液；慢性者睾丸及副睾结缔组织增生、肥厚及粘连。精囊可能有出血及坏死灶。公猪睾丸及副睾肿大，切开见有豌豆大小的化脓和坏死灶、化脓灶，甚至有钙化灶。据统计，34％～95％病猪的睾丸发生化胀坏死性炎症。 猪患布鲁氏菌病还常见有关节炎，主要侵害四肢较大的复活关节。滑液囊有浆液和纤维素，重时见有化脓性炎症和坏死，甚至还见脊柱骨、管骨的炎症或脓肿。淋巴结、肝、脾、肾、乳腺等也可能见到布鲁氏菌病性结节病变。
07. 防治措施
1．坚决保护健康猪群 对从未发生过布鲁氏菌病的健康猪群，必须贯彻“预防为主”的方针和坚持自繁自养的原则，防止从外部引入病猪。若必须从外单位引进种猪时，应从无此病地区购买，要进行检疫，购进后隔离观察2个月，再进行检疫，确实健康的方可并群饲养。同时，也要防止运入被污染的畜产品和饲料。每年定期对猪群进行布鲁氏菌病检疫，以能及时发现病猪。若有原因不明的流产时，必须严格隔离流产母猪，对流产胎儿及胎衣要进行微生物学检查，而且要严格消毒处理，对流产猪只做血清学检查，直到证明为非传染性流产时，才能取消隔离。 2．受威胁猪群的预防措施 (1)对猪群进行定期检疫(至少每年一次)，并要当作一件防疫制度固定执行，以能及时发现和处理患病猪只。 (2)定期进行免疫注射，是预防控制本病的有效措施。 我国用于预防猪布鲁氏菌病的是用猪布鲁氏菌弱毒S2株制成的活疫苗。该苗毒力稳定、使用安全、免疫力好，是我国选育的一种优良布鲁氏菌菌苗。本疫苗适于口服免疫和肌肉注射。 ①口服免疫：每头猪200亿菌，间隔1个月再口服一次。口服菌苗不受怀孕限制，可在配种前1～2个月进行，亦可在怀孕期使用。如果猪群大，可按全群猪数计算所需菌苗量，将菌苗拌入水中或饲料中，让全群饮服。如果猪数少，可逐头灌服。在饮服时，不能用热水以免烫死细菌，拌入饲料中时，应避免使用含有抗生素添加剂的饲料、发酵饲料或热饲料。在服菌苗前后3天，应停止使用抗生素添加剂饲料和发酵饲料。 ②注射免疫：每头猪200亿菌，间隔1个月再注射一次。妊娠母猪不宜注射。所用菌应稀释后当天用完。无论猪是口服还是注射，免疫期为1年。本疫苗对人有一定致病力，工作人员在使用疫苗时，应注意个人防护，以防感染。用具需煮沸消毒。 3．发病种猪群的康复措施 (1)定期检疫和隔离病猪 用凝集反应定期普遍检疫，将检出的阳性和可疑反应病种行屠宰淘汰。特别贵重的种猪可隔离饲养，继续利用。曾检出病猪的猪群在未达到净化前，应当做可疑病猪群隔离饲养，并反复地进行检疫，及时挑出病猪。对隔离群要严行隔离措施，避免病、健康猪只接触，防止人员互相串往。在经两次连续检疫，全群无流产和公猪睾丸炎病例时，才可认为本猪群得到净化。 (2)加强消毒及兽医卫生措施 对隔离猪场、用具等进行常规的消毒。做好猪产房的卫生及消毒工作。妥善处理流产胎儿、胎衣、胎水及分泌物。粪便堆积发酵后利用。工作人员的防护工作。特别是发生流产时要注意防护。 (3)病种猪的处理 由于猪只饲养的周转较快，病猪以饲养屠宰淘汰为宜。实践证明逐步淘汰和肉品合理利用是一种积极的措施，各地可因地制宜采用。此外，对特别贵重的病种猪，可考虑进行对症治疗，如子宫炎时的冲洗和治疗、抗生素的应用等等。 (4)培育健康幼龄种猪 这是净化病猪群，更新猪群的一项积极措施。仔猪在断乳后饲养，2月龄和4月龄各检疫一次，两次检疫为阴性时，才可认为是健康仔猪。
